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微生物和细胞生长的光密度(OD)测量是微生物学及生物发酵实验室中最常用的方法之一,用于在进行蛋白表达或监测培养过程时确定收获的最佳时间。细胞、细菌或酵母在液体培养基中的生长情况(细胞密度、细菌生长、酵母生长)通常通过测量600nm下的光密度(OD600)来获得。OD600测量通常用于确定细菌培养物的生长阶段,这些测量有助于确保在适当的细胞密度下收获细胞。
由于OD600测量的光密度是由光散射而非光吸收引起的,因此细胞的大小和形状以及死细胞和碎片可能会增加光散射。因此,当在相同的仪器上测量时,处于相同密度水平(如Cells/mL)的不同细胞类型可能显示出不同的OD600值。 朗伯-比尔定律与OD600 OD600读数的差异 OD600校正值公式 NanoPhotometer®或OD600 DiluPhotometer™等仪器默认“校正系数”为1,如使用相应方法进行调整,将有助于在不同设备之间提供可比较的结果。 OD600校正因子= 设备1测量值 / 设备2测量值 通常建议使用试管或比色皿进行OD600测量,以确保读数的稳定性,较大体积样品提供了更大的浊度平均值,误差相对较小。此外,为了防止菌体沉降过快,并给出随时间变化的OD读数,可向样品中添加甘油。对于一些很小的样品量要求,使用微滴进行测量,也是可行的,特别是NanoPhotometer®的样品压缩法,在液膜中测量,可避免液柱中显著的沉降现象。但需注意在上样前样品的充分混匀。 为了减少OD600测量所需的体积,并避免耗时且容易出错的手动稀释,可以使用特殊的比色皿。Implen的DiluCell™自动稀释比色皿可降低样品体积要求,并提供自动虚拟样品稀释。由于DiluCell™的独特设计,光路从标准的10毫米减少到1毫米(DC 10)。根据朗伯-比尔定律,光程因子为10。使用DiluCell™自动稀释可节省时间,并排除稀释误差和交叉污染。 德国Implen提供多种OD600测量解决方案,包括应用于基础测量和高级工艺开发的不同机型,具有可靠的测量结果和丰富的软件功能,以及合规性功能,能够充分满足不同用户的需求。OD600测量,认准德国Implen。
